譜析分享:動植物油脂、脂肪酸甲酯的氣相色譜分析方案
GC-17氣相色譜儀是山東譜析推出的一款專用色譜分析系統,可用于植物油油品的分析、用于植物油鑒別及其各種油品摻兌的氣相色譜檢測。
摘要:主要用于植物油油品的分析、用于植物油鑒別及其各種油品摻兌的氣相色譜檢測。傳統食用植物油有花生油、大豆油、芝麻油、菜籽油和棉籽油等;而近年來市場上可見的新型食用油有紅花油、葵花籽油、油茶籽油、玉米胚油、芥菜籽油、橄欖油和調和油等,其中調和油又根據混合在一起的油的品種不同分為多種。植物油主要由棕櫚酸等脂肪酸組成的甘油酯,不同油品的植物油脂肪酸組成與含量不同,摻偽后必然會改變其脂肪酸組成與含量,用氣相色譜法分析脂肪酸的構成比, 儀器可用于快速鑒別常見植物油的種類,對常見植物油是否摻偽可作出快速判別,同時對摻偽植物油可作定性、定量分析。
一、本方法引用標準及應用范圍
本方法完全滿足GB/T17377-2008《動植物油脂 脂肪酸甲酯的氣相色譜分析》以及GB/T17376-2008《動植物油脂 脂肪酸甲酯制備》中的規定。
本方法可以檢測下列各種植物油品種
1)豆油,主要脂肪酸組成是亞油酸50%-55%,油酸22%-25%,棕櫚酸10%-12%,亞麻酸7%-9%。亞油酸和α-亞麻酸是兩種人體必需的脂肪酸。精煉豆油中維生素E的含量為60-110mg/100g。
2)菜籽油,其脂肪酸的組成受氣候、品種等的影響較大。菜籽油中含有較多可能對健康不利的芥酸,其主要脂肪酸組成是亞油酸10%-20%,油酸10%-35%,棕櫚酸2%-5%,亞麻酸5%-15%,芥酸25%-55%,花生四烯酸7%-14%。
3)花生油,具有獨特的花生氣味和風味,可直接用于制造起酥油、人造奶油、蛋黃醬,也是良好的煎炸油。花生油的脂肪酸組成比較獨特,含有6%-7%的長鏈脂肪酸,因此,花生油具有良好的氧化穩定性。
4)玉米油,又稱為玉米胚芽油、粟米油,主要脂肪酸組成是亞油酸55%-60%,油酸25%-30%,棕櫚酸10%-12%,亞麻酸2%以下。玉米油含亞油酸高,其降血清膽固醇的效能優于其他油脂。又由于玉米油富含維生素E,所以,其氧化穩定性也較好。
5)葵花籽油,是為數不多的高亞油酸油脂之一,故有人將它與玉米油列為“健康保健油脂”。其主要脂肪酸組成是亞油酸65%-78%,油酸14%-17%,棕櫚酸6%-8%,硬脂酸2%-3%,維生素E的含量為100mg/100g,還含有綠原酸,其氧化穩定性好,但它不宜單獨用于煎炸食品。
6) 橄欖油,是從油橄欖鮮果中直接壓榨出來的果汁,分離掉其中的水分后取得。單不飽和脂肪酸含量高達80%以上,必需脂肪酸亞油酸與亞麻酸的比例為1:4,正好符合人體對攝入脂肪的標準,對人體健康尤其是心臟健康有益。世界衛生組織調查表明,以橄欖油為首選食用油的希臘,心血管系統和癌癥發病率極低。
7) 茶油,是利用油茶的種子榨制的一種優質食用油。茶油含有豐富的維生素E、D、K和-胡蘿卜素,不飽和脂肪酸含量高達85%-97%,比橄欖油的含量還要高,茶油還含有茶多酚和茶皂甙,對降低膽固醇和抗癌有明顯的功效。
二、實驗原理
本實驗甲酯化方法采用國標GB/T 17376-2008,甘油酯皂化后,釋出的脂肪酸進行酯化,萃取得到脂肪酸甲酯用于氣相色譜分析。
樣品中的脂肪酸經過適當的前處理(甲酯化)后,進樣,樣品在汽化室被汽化,在一定的溫度下,汽化的樣品隨載氣通過色譜柱,由于樣品中組分與固定相間相互用的強弱不同而被逐一分離,分離后的組分,到達檢測器時經檢測口的相應處理,產生可檢測的信號。根據色譜峰的保留時間定性,歸一法確定不同脂肪酸的百分含量。
三、儀器及試劑配置:
檢測項目:植物油中脂肪酸的測定
氣相色譜儀器型號: GC-17 配有FID檢測器
毛細管色譜柱:專用毛細管柱
色譜工作站(電腦1臺自備)
氮氫空發生器 各一臺或高純氮、氫氣、空氣鋼瓶各一瓶
其它儀器
.1.恒溫水浴鍋2.移液管3.膠頭滴管4.小圓底燒瓶
.5.冷凝管6. 樣品瓶
試劑:.石油醚、乙醚、氫氧化鉀、甲醇均為AR級。
四、實驗步驟
(一)樣品預處理
酯化測定:
取0.2g油樣于10ml容量瓶中,加5.0ml 4:3石油醚—乙醚,使其溶解,再加4.0ml 0.5mol/L氫氧化鉀—甲醇溶液,振搖1分鐘,放置8min后加水1.0ml,靜止20min使之分層,取上層液注入色譜儀,保留時間定性,面積歸一化法定量。
測定:
(1)氣相色譜條件
①色譜柱:石英彈性毛細管柱,0.32mm(內徑)×30m,內膜厚度0.5um。
②程序升溫:150℃保持3min,5℃/min升溫至220℃,保持10min;進樣口溫度250℃;檢測器溫度300℃。
③氣體流速:氮氣:40mL/min,氫氣:40mL/min,空氣:450mL/min,分流比30﹕1。
(2)色譜分析
吸取0.4-1μL試樣液注入氣相色譜儀,記錄色譜峰的保留時間和峰面積。利用標準圖譜確定每個色譜峰的性質(定性),利用工作站軟件計算各脂肪酸組分的百分含量。
五、鑒別
測定常見植物油主要脂肪酸的構成比并查閱有關資料,經統計學處理,不同的植物油主要脂肪酸的組成大部分有相同之處,但是主要脂肪酸的含量是不相同的。根據脂肪酸組成與含量,即可鑒別油品種類。
氣相色譜法測定脂肪酸,通常用硫酸—甲醇法,我們采用了氫氧化鉀-甲醇法。