高效液相色譜儀測定蛹蟲草培養基中核苷類成分
2020-02-06 10:39:53來源：admin
蛹蟲草(Cordyceps militaris (L.ex Fr.)Link)又稱北蟲草、北冬蟲夏草，與冬蟲夏草同屬異種，有效成分相近，同時又可以大規模的人工栽培，現代科學研究發現其具有抗癌、增強免疫、降血壓等多種藥理活性。現已被廣泛應用于藥品和保健品中。蛹蟲草所含的一類重要活性成分是核苷和堿基，包括蟲草素、腺苷等。其中腺苷具有改善心腦血液循環、抑制中樞神經遞質釋放等多種活性，現已被我國用作冬蟲夏草及其制品和代用品的質控指標之一；蟲草素則具有抗病毒、抑制腫瘤等功效，目前在美國作為治療白血病藥物的研究已經進入二期臨床，開發潛力巨大。
目前，核苷類物質的檢測方法以高效液相色譜儀分析為主，包括正相、反相、質譜聯用等，還有毛細管電泳分析測定，但大都只將核苷類成分中的1～3 個作為質控指標進行評估。本研究在高效液相色譜中采用了正相柱分析，用8 個核苷類成分作為對照，考察測定方法的精密度、重復性和穩定性，以此作為各樣品核苷類成分的分析方法。
人工栽培蛹蟲草培養基中含有大量的蟲草素，與相應的子實體相比，培養基來源充足，價格低廉，作為制備蟲草素的原料，可以大大降低成本。但是由于目前栽培的蛹蟲草菌種來源不同，其培養基中蟲草素含量是否具有很大的差異，與對應的子實體中蟲草素含量的差異是否存在相關性等需要進一步研究。故本實驗對市場上冬蟲夏草及不同來源的蛹蟲草子實體中核苷類物質的含量進行分析測定，并對同一菌種的子實體和培養基進行核苷類成分的比較，分析蛹蟲草固體發酵產物中核苷類成分的含量，為蟲草相關制品的開發提供依據。
山東譜析采用高效液相色譜儀法測定蟲草中的核苷類成分，優化后的色譜條件為YMC-Polyamine 柱（250mm× 4.6mm，5μm）；采用梯度洗脫，流動相：乙腈- 水（V/V）：0～15min 為90：10，15～20min 為86.5：13.5，20～30min 為75：25，30～35min 為70：30；流速：1mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：259nm；進樣量：10μL。結果表明：胸腺嘧啶、蟲草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鳥嘌呤、次黃嘌呤均能得到較好分離，該方法穩定性好、精密度高、重現性好，適用于蟲草中的核苷類成分的分析。經分析發現，蛹蟲草子實體核苷類物質組成大致相似，但含量差異非常顯著，同時發現蛹蟲草培養基殘基及固體發酵產物中蟲草素含量較高，其他核苷類成分很少，因此認定蛹蟲草培養基殘基及固體發酵產物是非常優良的分離純化蟲草素的原料。
以上測定蟲草中的核苷類成分高效液相色譜儀方案由山東譜析儀器色譜小編整理制定，不盡事宜歡迎各界朋友共同探討研究。更多分析上的詳細資料可電話或通過公司網站了解垂詢，歡迎合作。
