新購(gòu)買(mǎi)的色譜柱如何安裝、老化及驗(yàn)收？

2020-11-09 10:16:29來(lái)源：admin

在檢測(cè)過(guò)程中，更換新的色譜柱是會(huì)經(jīng)常碰到的事情。液相色譜柱的更換只需要把兩端的螺帽擰緊就行，十分簡(jiǎn)單。而對(duì)于氣相色譜來(lái)說(shuō)更換色譜柱則是比較繁瑣的事情，而且安裝不當(dāng)，不但無(wú)法進(jìn)行檢測(cè)，而且會(huì)對(duì)色譜柱和機(jī)器的性能產(chǎn)生嚴(yán)重?fù)p傷，甚至可能會(huì)出現(xiàn)安全事故，特別是使用氫氣等可燃性氣體作為載氣時(shí)，要特別小心。

新買(mǎi)的色譜柱或長(zhǎng)時(shí)間沒(méi)有使用的色譜柱，在使用前都需要進(jìn)行老化處理，以除去色譜柱中殘留的氧化物、未交聯(lián)的固定液等；新買(mǎi)的色譜柱還要進(jìn)行驗(yàn)收工作以保證其能滿足實(shí)驗(yàn)室分析的要求。那么在日常分析工作中，如何進(jìn)行正確的安裝、老化和驗(yàn)收色譜柱?

色譜柱要正確安裝，才能發(fā)揮其最佳的性能和延長(zhǎng)其使用壽命。安裝不正確將嚴(yán)重影響目標(biāo)物的分離，出現(xiàn)色譜峰形異常或鬼峰，不但嚴(yán)重影響定量精度，甚至使分析工作無(wú)法進(jìn)行。色譜柱安裝不正確，有可能會(huì)導(dǎo)致色譜柱的破損或堵塞，如安裝過(guò)程中沒(méi)有將柱頭朝下，即可能使密封墊碎屑進(jìn)入柱管而造成堵塞。

石英毛細(xì)管柱的聚酰亞胺涂層，如有少許破損就可能導(dǎo)致脆弱的石英毛細(xì)管發(fā)生斷裂。如已經(jīng)斷裂的色譜柱，仍在高溫下連續(xù)運(yùn)行或是多階溫度程序運(yùn)行，很可能損壞色譜柱，因破裂的后半段暴露在高溫的氧氣中，這樣一來(lái)會(huì)很快地破壞固定相。如果使用氫氣作為載氣，因安裝不正確，可能會(huì)導(dǎo)致漏氣，甚至發(fā)生爆炸，很可能出現(xiàn)安全事故，危及儀器及操作者的生命安全。

對(duì)色譜柱進(jìn)行老化，一方面是徹底除去填充物中的殘留溶劑和某些揮發(fā)性的物質(zhì)；另一方面是促進(jìn)固定液均勻牢固地分布在載體的表面上。

因?yàn)闅庀嗌V柱的固定相通常是以涂覆的形式分布在柱管管壁內(nèi)側(cè)(毛細(xì)管柱)或載體表面(填充柱)上的，對(duì)于一根新的氣相色譜柱，外層固定相與載體的結(jié)合往往較弱，在高溫下使用會(huì)緩慢流失，造成基線起伏和噪聲升高，為了避免這一現(xiàn)象發(fā)生，可以預(yù)先在較高溫度下(一般為色譜柱的最高耐受溫度)加熱一段時(shí)間，使結(jié)合較弱的固定相揮發(fā)除去，從而使后面的分析不受干擾。此外，對(duì)使用時(shí)間較長(zhǎng)的氣相色譜柱可進(jìn)行老化操作，可以除去色譜柱中殘留的污染物。

色譜柱的安裝把毛細(xì)管柱安裝在色譜儀上時(shí)，需要將其兩端分別與進(jìn)樣口和檢測(cè)器相連接。一般儀器所用的接頭有兩種，分別是內(nèi)螺紋接頭和外螺紋接頭。原理都是用一個(gè)石墨密封墊，通過(guò)接頭壓緊而達(dá)到固定和密封的目的。

正確的安裝請(qǐng)參考以下步驟：

a．檢查氣體過(guò)濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等，保證輔助氣和檢測(cè)器的用氣暢通有效。如果以前做過(guò)較臟樣品或活性較高的化合物，需要清洗或更換進(jìn)樣口的襯管。

b．先將密封墊套在柱頭，此時(shí)應(yīng)將柱頭向下，避免密封墊碎屑進(jìn)入柱管而造成堵塞。將石墨墊套在柱頭后，應(yīng)將柱頭截去1～2crn。可用專門(mén)的柱切割器，也可用一個(gè)開(kāi)安瓿瓶的磁片，在柱頭上輕輕地劃一下，然后用手掰斷。這樣做可以保證柱端是整齊的，又避免了柱頭污染物對(duì)分析的干擾，因?yàn)榻厝チ舜┻^(guò)密封墊時(shí)可能進(jìn)入柱頭的污染物，或者運(yùn)輸過(guò)程中可能損壞的柱端。

將色譜柱連接于進(jìn)樣口上，色譜柱在進(jìn)樣口中插入深度根據(jù)所使用的GC儀器不同而定。正確合適的插入能最大限度地保證試驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性。通常來(lái)說(shuō)，色譜柱的入口應(yīng)保持在進(jìn)樣口的中下部，當(dāng)進(jìn)樣針穿過(guò)隔墊完全插入進(jìn)樣口后，如果針尖與色譜柱入口相差1～2cm，這就是較為理想的狀態(tài)。檢測(cè)器一端則是柱出口盡量接近檢測(cè)點(diǎn)(如FID的火焰)，以避免死體積造成的柱外效應(yīng)(具體的插入程度和方法參見(jiàn)所使用GC的使用手冊(cè))。避免用力彎曲擠壓毛細(xì)管柱，并小心，不要讓標(biāo)記牌等有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)柱接觸摩擦，以防柱身斷裂受損。

c．用手把連接螺母擰上，擰緊后(用手?jǐn)Q不動(dòng)了)用扳手再多擰1／4～1／2圈，保證安裝的密封程度。因?yàn)椴痪o密的安裝，不僅會(huì)引起載氣的泄漏，而且有可能對(duì)色譜柱造成永久損壞。為保證柱端伸出的長(zhǎng)度準(zhǔn)確，可在截去柱端后，先量好柱頭伸出長(zhǎng)度，然后用記號(hào)筆或改字液在接頭下方的色譜柱上做記號(hào)，擰緊接頭以后保證該記號(hào)正好位于柱頭端面。這樣就避免了擰緊過(guò)程中柱管移動(dòng)可能造成的伸出長(zhǎng)度不準(zhǔn)確。

d．接通載氣。當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后，由柱長(zhǎng)、柱內(nèi)徑等參數(shù)選取初始的柱前壓，然后通載氣，調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。

將色譜柱的出口端插入裝有正己烷的樣品瓶中，正常情況下，我們可以看見(jiàn)瓶中有穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒(méi)有氣泡，就要重新檢查一下載氣裝置和流量控制器等是否設(shè)置正確，并檢查整個(gè)氣路有無(wú)泄漏。等所有問(wèn)題解決后，將色譜柱出口從瓶中取出，保證柱端口無(wú)溶劑殘留，再進(jìn)行下一步的安裝。

e．將色譜柱連接于檢測(cè)器上，其安裝和注意的事項(xiàng)與色譜柱與進(jìn)樣口連接大致相同。如果在應(yīng)用中系統(tǒng)所使用的是ECD或NPD等，那么在老化色譜柱時(shí)，應(yīng)該將柱子與檢測(cè)器斷開(kāi)，這樣檢測(cè)器可能會(huì)更快達(dá)到穩(wěn)定。

f．確定載氣流量，再對(duì)色譜柱的安裝進(jìn)行檢查。注意：如果不通入載氣就對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱，會(huì)快速且永久性地?fù)p壞色譜柱。

色譜柱的老化與老化效果檢測(cè) 色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后，就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化了。

a．老化的方法老化的方法通常是將色譜柱升至一恒定溫度，通常為其溫度上限。特殊情況下，可加熱至最高使用溫度之上約10~20℃，但是一定不能超過(guò)色譜柱的溫度上限，那樣極易損壞色譜柱。

當(dāng)?shù)竭_(dá)老化溫度后，記錄并觀察基線。初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升，在到達(dá)老化溫度后5～l0min開(kāi)始下降，并且會(huì)持續(xù)30~90min。當(dāng)?shù)竭_(dá)一個(gè)固定的值后就會(huì)穩(wěn)定下來(lái)。如果在2～3h后基線仍無(wú)法穩(wěn)定或在15~20min后仍無(wú)明顯的下降趨勢(shì)，那么有可能系統(tǒng)有泄漏或者污染。遇到這樣的情況，應(yīng)立即將柱溫降到40℃以下，盡快地檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問(wèn)題。如果還繼續(xù)老化，不僅對(duì)色譜柱有損壞而且始終得不到正常、穩(wěn)定的基線。

另外，老化的時(shí)間也不宜過(guò)長(zhǎng)，不然會(huì)降低色譜柱的使用壽命。一般來(lái)說(shuō)，涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間長(zhǎng)，而弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需時(shí)間較短。

b．設(shè)置確認(rèn)載氣流速對(duì)于毛細(xì)管色譜柱，載氣的種類首選高純度氮?dú)饣驓錃狻］d氣的純度最好大于99. 995％，而其中的含氧量越少越好。如果使用的是毛細(xì)管色譜柱，那么依照載氣的平均線速度(cm／s)，而不是利用載氣流量(mL／min)來(lái)對(duì)載氣做出評(píng)價(jià)。因?yàn)橹У挠?jì)算采用的是載氣的平均線速度。推薦平均線速度值：氮?dú)鉃?0～1 2cm／s；氫氣為20～25cm／s。

在載氣的管線中加入氣體過(guò)濾裝置不僅可以延長(zhǎng)色譜柱壽命，而且很大程度地降低了背景噪聲。建議最好安裝一個(gè)高容量脫氧管和一個(gè)載氣凈化器。使用ECD系統(tǒng)時(shí)，最好能在其輔助氣路中也安裝一個(gè)脫氧管。

c．柱流失檢測(cè) 在色譜柱老化過(guò)程結(jié)束后，利用程序升溫作一次空白試驗(yàn)(不進(jìn)樣)。一般是以10℃／min從50℃升至最高使用溫度，達(dá)到最高使用溫度后保持10min。這樣我們就會(huì)得到一張流失圖。這些數(shù)值可能對(duì)今后作對(duì)比試驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)問(wèn)題的解決有幫助。

在空白試驗(yàn)的色譜圖中，不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn)。如果出現(xiàn)了色譜峰，通常可能是從進(jìn)樣口帶來(lái)的污染物。如果在正常的使用狀態(tài)下，色譜柱的性能開(kāi)始下降，基線的信號(hào)值會(huì)增高。另外，如果在很低的溫度下，基線信號(hào)值明顯地大于初始值，那么有可能是色譜柱和GC系統(tǒng)有污染。

③新色譜柱的驗(yàn)收新買(mǎi)的氣相色譜柱到貨后要進(jìn)行驗(yàn)收，驗(yàn)收首先是對(duì)貨物的外包裝進(jìn)行觀察，如有破損，應(yīng)直接拒絕接受，要求供應(yīng)商重新發(fā)貨。打開(kāi)包裝后，色譜柱如沒(méi)有可見(jiàn)的斷裂、破損，可在安裝、老化后使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行柱效測(cè)試。

新柱子都有說(shuō)明書(shū)，說(shuō)明書(shū)一般都附有質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告，附譜圖、條件、試樣等，如果實(shí)驗(yàn)室備有相應(yīng)的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，可照其條件試驗(yàn)一下，計(jì)算塔板數(shù)、分離度等，與其報(bào)告相差不大即可。亦可依據(jù)自己的分析用途，用本實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際條件進(jìn)行樣品分析，與實(shí)驗(yàn)室以前的正常柱子比較，保留時(shí)間、分離度、塔板數(shù)等是否正常即可判斷。建議保留新柱子的測(cè)試圖譜，以備以后柱效下降時(shí)對(duì)比參考。

④其他色譜柱的保存，用進(jìn)樣墊將色譜柱的兩端封住，并放回原包裝。在安裝時(shí)要將色譜柱的兩端截去一部分，以確保沒(méi)有進(jìn)樣墊的碎屑?xì)埩粲谥小?/span>

新購(gòu)買(mǎi)的色譜柱如何安裝、老化及驗(yàn)收？

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